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糞大腸菌群值測定

2025-06-13 關(guān)鍵詞:糞大腸菌群值測定測試范圍,糞大腸菌群值測定測試儀器,糞大腸菌群值測定測試案例 相關(guān):
糞大腸菌群值測定

糞大腸菌群值測定摘要:糞大腸菌群值測定是一種用于評估水體、土壤等環(huán)境樣本中糞便污染的微生物檢測技術(shù),核心對象為糞大腸菌群細菌(如Escherichiacoli)。關(guān)鍵項目包括定量計數(shù)方法(如多管發(fā)酵法最大可能數(shù)MPN)、生化確證試驗(如吲哚試驗陽性率)和溫度生長特性(44.5°C培養(yǎng)抑制)。該檢測基于ISO和GB標準,提供微生物濃度數(shù)據(jù),應(yīng)用于水質(zhì)衛(wèi)生監(jiān)控、污染源追蹤等公共衛(wèi)生領(lǐng)域,確保樣本符合安全限值。

參考周期:常規(guī)試驗7-15工作日,加急試驗5個工作日。

注意:因業(yè)務(wù)調(diào)整,暫不接受個人委托測試,望諒解(高校、研究所等性質(zhì)的個人除外)。

檢測項目

定量計數(shù)方法:

  • 多管發(fā)酵法:最大可能數(shù)(MPN)、陽性管數(shù)(參照GB/T5750.12)
  • 膜過濾法:菌落形成單位(CFU)、濾膜孔徑0.45μm(參照ISO9308-1)
  • 酶底物法:陽性孔數(shù)、熒光閾值(參照ASTMD5392)
生化特性檢測:
  • 吲哚試驗:陽性率≥95%(參照MLG方法)
  • 乳糖發(fā)酵:產(chǎn)酸產(chǎn)氣特性、發(fā)酵時間48h(參照ISO9308-1)
  • 氧化酶試驗:陰性反應(yīng)率≥98%(參照GB/T4789.3)
分子生物學(xué)檢測:
  • PCR擴增:特異性基因靶點(如uidA基因)、擴增循環(huán)數(shù)40
  • 熒光定量PCR:Ct值≤35、檢測限10CFU/mL(參照ISO/TS13136)
溫度適應(yīng)性檢測:
  • 高溫培養(yǎng):44.5°C生長抑制、培養(yǎng)時間24h(參照ASTMD5392)
  • 低溫存儲:4°C存活率、保存期限72h(參照GB/T5750.12)
樣品前處理:
  • 均質(zhì)化處理:攪拌速度200rpm、處理時間30min(參照ISO5667)
  • 稀釋梯度:10倍系列稀釋、稀釋液pH7.2(參照GB/T4789.3)
質(zhì)量控制指標:
  • 陽性對照:標準菌株濃度10^5CFU/mL(參照ISO11133)
  • 陰性對照:無菌水空白率≤1%(參照GB/T27405)
  • 重復(fù)性測試:相對標準偏差RSD≤5%(參照ASTME691)
耐藥性測試:
  • 抗生素敏感性:抑菌圈直徑≥15mm(參照CLSIM100)
  • 多重耐藥指數(shù):耐藥基因檢測(如blaTEM)
環(huán)境適應(yīng)性檢測:
  • pH耐受:生長范圍pH6-8、最適pH7(參照ISO9308-1)
  • 鹽度耐受:最高鹽濃度6%(參照ASTMD6503)
毒力因子分析:
  • 腸毒素檢測:毒素表達水平、陽性閾值(參照ISO/TS13136)
  • 粘附特性:菌毛形成率(參照GB/T4789.31)
標準參考物質(zhì)校準:
  • 認證參考物質(zhì):濃度值10^3-10^6CFU/mL(參照NISTSRM2917)
  • 校準曲線:線性范圍R2≥0.99(參照ISO11095)

檢測范圍

1.飲用水:涵蓋自來水、瓶裝水樣本,重點檢測總大腸菌群和糞大腸菌群濃度,確保符合GB5749衛(wèi)生限值。

2.地表水:包括河流、湖泊水樣,側(cè)重季節(jié)性污染監(jiān)控和糞源追蹤,檢測MPN或CFU值。

3.廢水:涉及污水處理廠出水、工業(yè)廢水,評估處理效率,重點關(guān)注生化需氧量BOD相關(guān)性。

4.土壤:涵蓋農(nóng)田、城市土壤樣本,檢測糞大腸菌群遷移規(guī)律,強調(diào)樣品均質(zhì)化前處理。

5.海水:包括近海、河口區(qū)域,評估海洋污染,側(cè)重鹽度適應(yīng)性檢測。

6.食品接觸表面:如餐具、加工設(shè)備,檢測表面擦拭樣本,確保無菌或低菌狀態(tài)。

7.污泥:污水處理污泥樣本,重點檢測病原體滅活效果和腐熟度指標。

8.空氣樣本:涵蓋室內(nèi)外空氣濾膜,監(jiān)測氣溶膠傳播風(fēng)險,強調(diào)低濃度檢測方法。

9.生物固體肥料:如堆肥產(chǎn)品,評估衛(wèi)生安全性,側(cè)重高溫處理驗證。

10.食品原料:包括生鮮果蔬、肉類,監(jiān)控加工環(huán)節(jié)污染,檢測關(guān)鍵限值符合性。

檢測方法

國際標準:

  • ISO9308-1:2014水質(zhì)-糞大腸菌群計數(shù)-膜過濾法
  • ISO16649-2:2001食品與飼料微生物學(xué)-大腸桿菌β-葡糖苷酸酶法
  • ASTMD5392-14用多管發(fā)酵技術(shù)確定水中糞大腸菌群的試驗方法
  • EPAMethod1604:2002糞大腸菌群在淡水中的膜過濾法
  • ISO/TS13136:2012食源性病原體分子檢測方法
國家標準:
  • GB/T5750.12-2006生活飲用水標準檢驗方法微生物指標
  • GB/T4789.3-2016食品微生物學(xué)檢驗大腸菌群計數(shù)
  • GB/T4789.38-2012食品微生物學(xué)檢驗大腸埃希氏菌計數(shù)
  • HJ/T347-2007水質(zhì)糞大腸菌群的測定多管發(fā)酵法
  • GB/T28001-2011環(huán)境管理環(huán)境監(jiān)測規(guī)范
(方法差異說明:國際標準如ISO采用44.5°C確證培養(yǎng),而GB標準優(yōu)化為本地化培養(yǎng)基成分;膜過濾法中ISO指定濾膜孔徑0.45μm,GB要求等效孔徑但補充樣品稀釋步驟;分子檢測方面,ISO優(yōu)先PCR,GB整合傳統(tǒng)生化法。)

檢測設(shè)備

1.恒溫培養(yǎng)箱:MemmertIN260型(溫度范圍20-65°C,精度±0.1°C)

2.膜過濾裝置:MilliporeXX40型(濾膜直徑47mm,孔徑0.45μm)

3.酶標儀:BioTekSynergyH1型(檢測波長450nm,精度±1%)

4.生物安全柜:EscoA2型(氣流速度0.4m/s,HEPA過濾效率99.99%)

5.顯微鏡:OlympusCX43型(放大倍數(shù)40-1000X,分辨率0.2μm)

6.PCR儀:AppliedBiosystems7500型(溫控范圍4-99°C,升降溫速率3°C/s)

7.均質(zhì)器:IKAT25型(轉(zhuǎn)速500-25000rpm,處理量1000mL)

8.離心機:Eppendorf5810R型(最大轉(zhuǎn)速15000rpm,容量6×100mL)

9.水浴鍋:JulaboF12型(溫度范圍5-99°C,穩(wěn)定性±0.01°C)

10.自動菌落計數(shù)器:Scan500型(計數(shù)范圍1-10^6CFU,誤差率±2%)

11.熒光顯微鏡:NikonEclipseNi型(激發(fā)波長488nm,檢測靈敏度0.1μg/mL)

12.pH計:MettlerToledoSevenEasy型(測量范圍0-14,精度±0.01)

13.電導(dǎo)率儀:HACHHQ40D型(量程0-200mS/cm,分辨率0.1μS/cm)

14.超凈工作臺:LabconcoPurifier型(風(fēng)速0.3-0.6m/s,潔凈度Class100)

15.分光光度計:ShimadzuUV-2600型(波長范圍190-1100nm,帶寬1nm)

北京中科光析科學(xué)技術(shù)研究所【簡稱:中析研究所】

報告:可出具第三方檢測報告(電子版/紙質(zhì)版)。

檢測周期:7~15工作日,可加急。

資質(zhì):旗下實驗室可出具CMA/CNAS資質(zhì)報告。

標準測試:嚴格按國標/行標/企標/國際標準檢測。

非標測試:支持定制化試驗方案。

售后:報告終身可查,工程師1v1服務(wù)。

中析儀器 資質(zhì)

中析糞大腸菌群值測定 - 由于篇幅有限,僅展示部分項目,如需咨詢詳細檢測項目,請咨詢在線工程師

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