放射變應(yīng)原吸附法IgE抗體定量檢測

2025-07-28 關(guān)鍵詞：放射變應(yīng)原吸附法IgE抗體定量檢測，中析研究所，CMA/CNAS資質(zhì)，北京中科光析科學(xué)技術(shù)研究所相關(guān)：

放射變應(yīng)原吸附法IgE抗體定量檢測摘要：放射變應(yīng)原吸附法（RAST）通過固相載體固定過敏原，利用放射性標記二抗定量檢測血清中過敏原特異性IgE抗體濃度。核心檢測對象為患者血清樣本中的sIgE抗體水平，關(guān)鍵項目包括結(jié)合率計算、標準曲線繪制（0.35-100kUA/L量程）及陽性閾值判定（≥0.35kUA/L）。該方法基于雙抗體夾心原理，檢測限達0.1IU/mL，批內(nèi)變異系數(shù)≤5%。

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參考周期：常規(guī)試驗7-15工作日，加急試驗5個工作日。

注意：因業(yè)務(wù)調(diào)整,暫不接受個人委托測試,望諒解(高校、研究所等性質(zhì)的個人除外)。

檢測項目

定量檢測參數(shù)：

sIgE抗體濃度：參考區(qū)間上限100kUA/L（WHOIRP75/502）
定量限：0.35kUA/L（信噪比≥3:1）

質(zhì)量控制參數(shù)：

標準曲線擬合度：R2≥0.99（4參數(shù)Logistic模型）
批間精密度：CV≤10%（≥1.0kUA/L樣本）

干擾物耐受性：

溶血干擾：Hb≤5g/dL時回收率90%-110%
脂血干擾：甘油三酯≤1000mg/dL時偏差≤±15%

放射性示蹤參數(shù)：

I-125標記率：≥85%（氯胺T氧化法）
比活度：15-20μCi/μg（適用期≤30天）

固相載體性能：

結(jié)合容量：≥500ngIgE/cm2（溴化氰活化纖維素）
批次均一性：CV≤8%（10批次測試）

交叉反應(yīng)驗證：

同屬過敏原交叉：≤25%（樺樹/榛子花粉）
異源蛋白干擾：牛血清白蛋白≤10mg/mL無干擾

穩(wěn)定性指標：

試劑開瓶穩(wěn)定性：2-8℃保存≥8周
血清樣本穩(wěn)定性：-70℃凍存≤24個月

方法學(xué)比對：

與免疫印跡法相關(guān)性：r≥0.85（屋塵螨抗原）
與熒光酶免偏差：≤±0.5logkUA/L

臨床分界值：

陽性閾值：Class1≥0.35kUA/L（Phadia單位）
強陽性閾值：Class4≥17.5kUA/L

基質(zhì)效應(yīng)驗證：

血清稀釋線性：1:2-1:8稀釋回收率85%-115%
高劑量鉤狀效應(yīng)：≥200kUA/L無前帶現(xiàn)象

檢測范圍

1.血清樣本：人血清/血漿（EDTA抗凝），重點檢測溶血（Hb＞0.5g/dL）及脂血（TG＞300mg/dL）干擾排除

2.吸入性過敏原：涵蓋塵螨（Derp1/Derf1）、花粉（樺樹Betv1、蒿草Artv1），側(cè)重季節(jié)性波動校正

3.食物性過敏原：牛奶（Bosd5）、雞蛋（Gald1）、花生（Arah2），聚焦熱穩(wěn)定性蛋白檢測

4.動物皮屑：貓（Feld1）、狗（Canf1），重點檢測唾液酸結(jié)合蛋白穩(wěn)定性

5.真菌孢子：鏈格孢（Alta1）、煙曲霉（Aspf1），檢測蛋白酶耐受性

6.職業(yè)過敏原：乳膠（Hevb5）、面粉（Tria14），評估低分子量抗原結(jié)合力

7.藥物半抗原：青霉素（BP-OL）、胰島素，檢測載體蛋白偶聯(lián)效率

8.昆蟲毒液：蜂毒磷脂酶A2（Apim1）、火蟻Soleni2，監(jiān)控天然毒素活性

9.寄生蟲抗原：蛔蟲（Ascs1）、血吸蟲，排除熱帶地區(qū)假陽性

10.臍帶血樣本：新生兒sIgE篩查，檢測靈敏度提升至0.1kUA/L

檢測方法

國際標準：

ISO17511:2020體外診斷醫(yī)療器械-測量生物樣品量的計量溯源性
CLSIEP17-A2檢測限和定量限評價方案
WHOIRP75/502IgE國際參考品標定規(guī)程

國家標準：

GB/T20468-2006臨床實驗室定量測定室內(nèi)質(zhì)量控制指南
YY/T1216-2020醫(yī)用體外診斷試劑盒通用技術(shù)要求
WS/T416-2013過敏原特異性IgE檢測指南

方法差異說明：GB/T20468要求采用Westgard多規(guī)則質(zhì)控（至少12.5s和41s規(guī)則），而CLSIEP17-A2推薦基于空白樣本重復(fù)檢測的LoB計算法；WHO標準品溯源采用國際單位（kUA/L），YY/T1216允許額外標注ng/mL單位但需注明換算系數(shù)。