參考周期：常規(guī)試驗(yàn)7-15工作日，加急試驗(yàn)5個(gè)工作日。

注意：因業(yè)務(wù)調(diào)整,暫不接受個(gè)人委托測(cè)試,望諒解(高校、研究所等性質(zhì)的個(gè)人除外)。

檢測(cè)項(xiàng)目

心肌細(xì)胞活力檢測(cè)：

• 細(xì)胞存活率：采用CCK-8法檢測(cè)，OD值≥0.8（參照ISO10993-5）
• 乳酸脫氫酶（LDH）漏出率：≤15%（參照ASTMF2149）
• 線粒體膜電位（Δψm）：JC-1熒光強(qiáng)度比≥1.5（參照GB/T16886.5）

• 三磷酸腺苷（ATP）含量：≥2.0μmol/g（參照ISO10993-12）
• 腺苷酸激酶（AK）活性：≤1.0U/mg（參照ASTMF1984）
• 乳酸（LAC）濃度：≤5.0mmol/L（參照GB/T21709.2）

• 丙二醛（MDA）含量：≤1.0nmol/mg（參照ISO14644-1）
• 鈣泵（Ca2?-ATPase）活性：≥0.5μmol/mg·min（參照ASTMF2315）
• 鈉離子-鉀離子泵（Na?/K?-ATPase）活性：≥0.3μmol/mg·min（參照GB/T19001）

• caspase-3活性：≤0.5U/mg（參照ISO10993-10）
• Bax/Bcl-2比值：≤1.0（參照ASTMF2471）
• 凋亡細(xì)胞比例：AnnexinV/PI雙染，≤10%（參照GB/T16886.6）

• 心肌條收縮力：≥2.0g（參照ISO13485）
• 收縮速度（+dF/dt）：≥100g/s（參照ASTMF2526）
• 舒張速度（-dF/dt）：≥80g/s（參照GB/T21709.3）

• 超氧化物歧化酶（SOD）活性：≥200U/mg（參照ISO10993-11）
• 谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性：≥50U/mg（參照ASTMF2602）
• 活性氧（ROS）水平：DCFH-DA熒光強(qiáng)度≤1.2倍對(duì)照（參照GB/T16886.7）

• 腫瘤壞死因子-α（TNF-α）含量：≤100pg/mg（參照ISO10993-8）
• 白細(xì)胞介素-6（IL-6）含量：≤50pg/mg（參照ASTMF2739）
• 細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）表達(dá)：Westernblot灰度值≤1.5倍對(duì)照（參照GB/T19001）

• 心肌細(xì)胞排列紊亂率：≤20%（參照ISO12871）
• 肌節(jié)完整性：Z線清晰率≥80%（參照ASTMF2864）
• 間質(zhì)水腫程度：HE染色，水腫面積≤15%（參照GB/T21709.4）

• 心肌特異性基因（α-MHC、cTnI）mRNA相對(duì)表達(dá)量：≥0.8倍對(duì)照（參照ISO15189）
• 凋亡相關(guān)基因（p53、Fas）mRNA相對(duì)表達(dá)量：≤1.2倍對(duì)照（參照ASTMF3006）
• 代謝相關(guān)基因（GLUT4、CD36）mRNA相對(duì)表達(dá)量：≥0.7倍對(duì)照（參照GB/T19495.1）

• 鈉離子（Na?）濃度：135-145mmol/L（參照ISO10303-22）
• 鉀離子（K?）濃度：3.5-5.5mmol/L（參照ASTMF3169）
• 鈣離子（Ca2?）濃度：1.1-1.3mmol/L（參照GB/T19495.2）

• 二甲基亞砜（DMSO）殘留量：≤0.1%（參照ISO10993-7）
• 甘油（Glycerol）殘留量：≤0.5%（參照ASTMF3268）
• 丙二醇（PG）殘留量：≤0.2%（參照GB/T16886.12）

檢測(cè)范圍

1.新鮮心肌組織：未經(jīng)過低溫處理的正常心肌組織，重點(diǎn)檢測(cè)baseline活力與代謝指標(biāo)

2.低溫保存心肌組織（4℃/24h）：4℃冰箱保存24小時(shí)的心肌組織，重點(diǎn)評(píng)估短期低溫對(duì)活力的影響

3.冷凍保存心肌組織（-80℃/1個(gè)月）：-80℃超低溫冰箱保存1個(gè)月的心肌組織，重點(diǎn)檢測(cè)長(zhǎng)期冷凍后的活力恢復(fù)率

4.玻璃化凍存心肌組織：采用玻璃化液處理后液氮保存的心肌組織，重點(diǎn)評(píng)估凍存損傷與復(fù)蘇后功能

5.心肌細(xì)胞懸液（原代培養(yǎng)）：原代分離培養(yǎng)的心肌細(xì)胞懸液，重點(diǎn)檢測(cè)細(xì)胞層面的活力與凋亡

6.心肌組織工程支架：搭載心肌細(xì)胞的組織工程支架，重點(diǎn)評(píng)估支架內(nèi)細(xì)胞的活力與功能

7.低溫保存心臟移植供體：心臟移植中低溫保存的供體心臟，重點(diǎn)檢測(cè)心肌收縮功能與代謝水平

8.缺血再灌注損傷心肌模型：缺血再灌注處理后的心肌組織，重點(diǎn)評(píng)估低溫保存對(duì)損傷的緩解作用

9.轉(zhuǎn)基因心肌組織：攜帶特定基因的心肌組織，重點(diǎn)檢測(cè)基因表達(dá)對(duì)低溫保存的影響

10.心肌細(xì)胞株（H9c2）：大鼠心肌細(xì)胞株，重點(diǎn)用于低溫保存策略的優(yōu)化研究

檢測(cè)方法

國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)：

• ISO10993-5:2017醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)第5部分：體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)（用于細(xì)胞存活率、LDH漏出率檢測(cè)）
• ASTMF2149-16組織工程醫(yī)療產(chǎn)品細(xì)胞活力檢測(cè)（用于線粒體膜電位、ATP含量檢測(cè)）
• ISO13485:2016醫(yī)療器械質(zhì)量管理體系用于法規(guī)的要求（用于試驗(yàn)流程規(guī)范與質(zhì)量控制）
• ASTMF2471-19組織工程醫(yī)療產(chǎn)品凋亡檢測(cè)（用于caspase-3活性、Bax/Bcl-2比值檢測(cè)）
• ISO12871:2011組織工程術(shù)語與定義（用于組織形態(tài)學(xué)觀察的指標(biāo)定義）

• GB/T16886.5-2017醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)第5部分：體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)（與ISO10993-5相比，增加了對(duì)中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（CHO）的推薦，適用于本土細(xì)胞株的毒性檢測(cè)）
• GB/T21709.1-2008醫(yī)用成像磁共振設(shè)備第1部分：安全要求（與ASTMF2149相比，更側(cè)重磁共振成像設(shè)備的安全操作規(guī)范，用于心肌結(jié)構(gòu)的無創(chuàng)檢測(cè)）
• GB/T19001-2016質(zhì)量管理體系要求（與ISO13485相比，更強(qiáng)調(diào)企業(yè)整體質(zhì)量管理，用于試驗(yàn)過程的全面管控）
• GB/T16886.6-2015醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià)第6部分：植入后局部反應(yīng)試驗(yàn)（與ASTMF2471相比，增加了植入后局部炎癥反應(yīng)的評(píng)估，適用于組織工程支架的長(zhǎng)期檢測(cè)）
• GB/T21709.4-2015醫(yī)用成像磁共振設(shè)備第4部分：性能要求（與ISO12871相比，更側(cè)重磁共振成像的性能指標(biāo)，用于心肌形態(tài)學(xué)的高精度檢測(cè)）

檢測(cè)設(shè)備

1.細(xì)胞活力分析儀：BeckmanCoulterVi-CellXR（檢測(cè)速度≥1000細(xì)胞/秒，存活率分辨率±1%，支持自動(dòng)聚焦與細(xì)胞計(jì)數(shù)）

2.線粒體膜電位檢測(cè)儀：ThermoFisherVarioskanLUX（熒光通道：Ex585/Em590nm、Ex488/Em530nm，檢測(cè)靈敏度≤0.1nmol/L，支持多通道同時(shí)檢測(cè)）

3.高速冷凍離心機(jī)：Eppendorf5810R（最大轉(zhuǎn)速15000rpm，溫度范圍-10℃~40℃，離心力≥20000×g，用于細(xì)胞分離與上清液提?。?/p>

4.酶標(biāo)儀：Bio-TekSynergyH1（光吸收范圍0.001-4.000OD，熒光靈敏度≤1pmol/L，支持終點(diǎn)法、動(dòng)力學(xué)法檢測(cè)）

5.Westernblot系統(tǒng)：Bio-RadChemiDocXRS+（分辨率≥500dpi，動(dòng)態(tài)范圍≥4.5log，支持化學(xué)發(fā)光與熒光檢測(cè)）

6.磁共振成像儀：SiemensMagnetomAera（1.5T磁場(chǎng)強(qiáng)度，空間分辨率≤0.5mm，支持T1、T2加權(quán)成像與功能成像）

7.流式細(xì)胞儀：BDFACSCantoII（檢測(cè)通道≥4個(gè)，分辨率≤2%CV，支持AnnexinV/PI雙染與細(xì)胞周期分析）

8.心肌收縮力測(cè)定系統(tǒng)：DMTMyoCam（收縮力測(cè)量范圍0-5g，分辨率≤0.01g，支持實(shí)時(shí)收縮曲線記錄）

9.離子色譜儀：DionexICS-5000+（檢測(cè)限≤0.01μmol/L，重復(fù)性≤0.5%RSD，用于Na?、K?、Ca2?濃度檢測(cè)）

10.倒置熒光顯微鏡：OlympusIX73（放大倍數(shù)10×-100×，熒光通道≥3個(gè)，支持活細(xì)胞成像與Z-stack掃描）

11.實(shí)時(shí)定量PCR儀：AppliedBiosystemsStepOnePlus（檢測(cè)靈敏度≤10copies/μL，重復(fù)性≤0.5%CV，支持熒光探針與SYBRGreen檢測(cè)）

12.超低溫冰箱：ThermoFisherRevcoUxFreezer（溫度范圍-86℃~-40℃，容量≥500L，支持溫度報(bào)警與遠(yuǎn)程監(jiān)控）

13.生物安全柜：EscoClassIITypeA2（風(fēng)速0.5m/s±0.05m/s，過濾效率≥99.99%，用于細(xì)胞操作與無菌處理）

14.冷凍干燥機(jī)：ChristAlpha1-4LDPlus（冷凝溫度≤-55℃，真空度≤0.1mbar，用于心肌組織的凍干保存）

15.電子天平：MettlerToledoXS205（量程220g，精度≤0.01mg，用于試劑稱量與樣品制備）

北京中科光析科學(xué)技術(shù)研究所【簡(jiǎn)稱：中析研究所】

報(bào)告：可出具第三方檢測(cè)報(bào)告(電子版/紙質(zhì)版)。

檢測(cè)周期：7~15工作日，可加急。

資質(zhì)：旗下實(shí)驗(yàn)室可出具CMA/CNAS資質(zhì)報(bào)告。

標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試：嚴(yán)格按國(guó)標(biāo)/行標(biāo)/企標(biāo)/國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)。

非標(biāo)測(cè)試：支持定制化試驗(yàn)方案。

售后：報(bào)告終身可查，工程師1v1服務(wù)。

中析儀器 資質(zhì)