參考周期：常規(guī)試驗7-15工作日，加急試驗5個工作日。

注意：因業(yè)務(wù)調(diào)整,暫不接受個人委托測試,望諒解(高校、研究所等性質(zhì)的個人除外)。

檢測項目

膜電位基礎(chǔ)參數(shù)：

• 靜息電位檢測：熒光強度比值（590/530nm≥1.5），震蕩頻率（≤0.05Hz）
• 去極化動力學：半衰期（t1/2≤180s），恢復(fù)速率（≥3mV/s）

• 活性氧產(chǎn)量：超氧陰離子（O2?-）通量（≥50nmol/min/mg），過氧化氫（H2O2）累積量（≥5μM）
• 抗氧化能力：谷胱甘肽還原酶活性（GR≥15U/mg），SOD清除率（≥75%）

• 線粒體鈣庫：鈣綠素熒光強度（激發(fā)/發(fā)射485/535nm），負荷臨界值（≥250μM）
• 通道狀態(tài)：mPTP開放概率（孔徑≥1.5nm），VDAC磷酸化率（≥40%）

• ATP合成：ATP產(chǎn)量（≥8μmol/g組織），合成酶活性（F0F1-ATPase≥120U/mg）
• 呼吸鏈功能：復(fù)合體IV活性（細胞色素c氧化≥0.8ΔOD/min/mg），質(zhì)子漏（≥15%）

• 磷脂組分：心磷脂含量（≥15μg/mg），磷脂酰乙醇胺/磷脂酰膽堿（PE/PC≤0.35）
• 膜流動性：DPH偏振值（P≥0.28），微粘度（η≥2.1cP）

• 凋亡因子釋放：細胞色素c胞質(zhì)濃度（≥60ng/mg），AIF核轉(zhuǎn)位率（≥30%）
• Caspase激活：Caspase-3活性（DEVD-pNA水解≥2.0nmol/min/mg）

• 抑制劑效應(yīng)：環(huán)孢素A阻斷濃度（IC50≤0.5μM），魚藤酮抑制率（≥90%）
• 激動劑閾值：ADP激活量（EC50≤35μM）

• 缺血再灌注：電位衰減率（≥25%/min），不可逆損傷率（≥40%）
• 心力衰竭：電位振蕩幅度（變異系數(shù)≥18%）

• 線粒體基質(zhì)：Rh123滯留時間（≥45min）
• 嵴結(jié)構(gòu)：TMRE聚焦度（半峰寬≤0.8μm）

• 低溫保護：25℃維持時間（ΔΨm保留≥85%/2h）
• 熱休克效應(yīng)：HSP70表達量（≥3倍基線）

檢測范圍

1.正常心肌組織：成年哺乳動物心室肌，檢測基礎(chǔ)膜電位穩(wěn)定性及鈣緩沖能力

2.缺血再灌注模型：離體心臟Langendorff灌注系統(tǒng)，重點驗證再灌注階段電位崩潰閾值

3.藥物毒性心?。?/strong>阿霉素誘導(dǎo)損傷模型，監(jiān)測mPTP持續(xù)性開放特征

4.遺傳修飾心?。?/strong>ANT1基因敲除組織，分析復(fù)合體V解耦聯(lián)效應(yīng)

5.糖尿病心肌?。?/strong>高糖培養(yǎng)心肌細胞，聚焦晚期糖基化產(chǎn)物對膜流動性影響

6.肥厚性心?。?/strong>主動脈縮窄模型，檢測電位振蕩頻率異常

7.衰老心肌細胞：老年動物（≥24月齡）線粒體，測定心磷脂氧化率（≥50%）

8.線粒體移植模型：外源性線粒體整合效率，驗證膜電位同步化程度

9.三維心肌微組織：類器官電傳導(dǎo)同步性，檢測區(qū)域電位梯度差（≤5mV）

10.冷凍復(fù)蘇心肌：深低溫保存樣本，評估復(fù)溫后電位恢復(fù)延遲時間

檢測方法

國際標準：

• ISO10993-22:2017醫(yī)療器械生物學評價-第22部分：納米材料線粒體毒性試驗
• ASTMF2312-11細胞活性熒光檢測標準指南（JC-1法）

國家標準：

• GB/T39730-2020細胞線粒體膜電位檢測技術(shù)規(guī)范（流式細胞術(shù)）
• GB/T41915-2022納米材料線粒體功能評估方法（共聚焦顯微術(shù)）

國標采用578nm激發(fā)波長檢測JC-1聚集體，與國際標準561nm存在光譜校準差異；GB/T41915規(guī)定鈣離子探針負載濃度為5μM，低于ISO標準的10μM

檢測設(shè)備

1.激光共聚焦顯微鏡：LSM980withAiryscan2（405/488/561/640nm四激光器，時間分辨率50ms）

2.流式細胞儀：CytoFLEXSLX（5激光18色檢測，熒光靈敏度<50MESF）

3.熒光微板讀數(shù)儀：SpectraMaxi3x（雙光柵單色器，波長范圍200-850nm）

4.膜片鉗系統(tǒng)：AxonMultiClamp700B（噪聲水平<0.5pARMS，采樣率500kHz）

5.活細胞工作站：OlympusIXploreSpinSR（環(huán)境控制精度±0.1℃/±0.1%CO2）

6.超分辨顯微鏡：NikonN-STORM（定位精度10nm，3D重構(gòu)層厚200nm）

7.ATP生物發(fā)光儀：PromegaGloMaxExplorer（檢測限0.1pmolATP）

8.氧耗分析系統(tǒng)：SeahorseXFe96（氧傳感器分辨率<1mmHg）

9.鈣離子成像系統(tǒng)：HamamatsuORCA-FusionBT（量子效率95%@500nm）

10.低溫恒溫器：LeicaCM1950（切片厚度精度±0.5μm）

11.蛋白質(zhì)印跡儀：Bio-RadChemiDocMP（動態(tài)范圍8個數(shù)量級）

12.離心濃縮儀：EppendorfVacufugePlus（真空度<10mbar）

13.顯微注射系統(tǒng)：EppendorfFemtoJet4i（注射壓力精度0.1hPa）

14.熒光壽命儀：PicoQuantFluoTime300（時間分辨率25ps）

15.電穿孔裝置：BTXECM830（脈沖參數(shù)0-3000V/0-99ms）

北京中科光析科學技術(shù)研究所【簡稱：中析研究所】

報告：可出具第三方檢測報告(電子版/紙質(zhì)版)。

檢測周期：7~15工作日，可加急。

資質(zhì)：旗下實驗室可出具CMA/CNAS資質(zhì)報告。

標準測試：嚴格按國標/行標/企標/國際標準檢測。

非標測試：支持定制化試驗方案。

售后：報告終身可查，工程師1v1服務(wù)。

中析儀器 資質(zhì)