參考周期：常規(guī)試驗(yàn)7-15工作日，加急試驗(yàn)5個工作日。

注意：因業(yè)務(wù)調(diào)整,暫不接受個人委托測試,望諒解(高校、研究所等性質(zhì)的個人除外)。

檢測項(xiàng)目

血管通透性量化檢測：

• 伊文思藍(lán)滲出量：μg/g組織（參照ISO10993-10）
• 熒光素鈉滲漏率：%（體外模型，參照ASTME1986）
• 跨內(nèi)皮電阻（TER）：Ω·cm2（細(xì)胞模型，參照YY/T1581）

• 組胺：pmol/mL（流式細(xì)胞術(shù)，參照GB/T34796）
• 白三烯C4（LTC4）：pg/mL（ELISA，參照OECD406）
• 前列腺素D2（PGD2）：ng/mL（化學(xué)發(fā)光法，參照ASTME1958）

• 內(nèi)皮一氧化氮合酶（eNOS）活性：U/mg蛋白（比色法）
• 血管細(xì)胞黏附分子-1（VCAM-1）表達(dá)量：熒光強(qiáng)度單位（免疫熒光法）
• 內(nèi)皮細(xì)胞凋亡率：%（AnnexinV/PI雙染，參照GB/T14926.61）

• 血管周圍炎癥細(xì)胞浸潤：評分0-4級（參照WHO標(biāo)準(zhǔn)）
• 內(nèi)皮細(xì)胞腫脹程度：胞質(zhì)空泡化率%（HE染色）
• 基底膜完整性：電鏡下斷裂面積比%（透射電鏡法）

• 主動全身過敏反應(yīng)（ASA）：評分0-5級（參照FDAGuidance）
• 被動皮膚過敏反應(yīng)（PCA）：藍(lán)斑直徑mm（參照OECD406）
• 遲發(fā)型超敏反應(yīng)（DTH）：足墊增厚率%（參照GB/T16886.10）

• Transwell內(nèi)皮細(xì)胞單層通透性：熒光素鈉透過率%/h（參照ASTME1986）
• 內(nèi)皮細(xì)胞間隙寬度：nm（原子力顯微鏡測定）
• 細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）降解率：MMP-2/MMP-9活性（明膠酶譜法，參照GB/T20186）

• IL-4：pg/mL（流式細(xì)胞術(shù)，參照BDBiosciencesProtocol）
• IL-13：pg/mL（ELISA，參照R&DSystemsKit）
• TNF-α：pg/mL（化學(xué)發(fā)光法，參照雅培i2000）

• 緊密連接蛋白（Claudin-5）：Westernblot灰度值（參照GB/T21976）
• 黏附連接蛋白（VE-cadherin）：免疫熒光強(qiáng)度（激光共聚焦法）
• 基底膜蛋白（laminin）：免疫組化評分0-3級（參照GB/T19838）

• 類胰蛋白酶：ng/mL（參照CLIA876.1200）
• 嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白（ECP）：μg/L（熒光酶免疫法）
• 血小板激活因子（PAF）：pmol/L（液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法）

• 內(nèi)皮細(xì)胞遷移率：劃痕愈合率%/24h（劃痕試驗(yàn)）
• 管腔形成能力：分支點(diǎn)數(shù)/視野（Matrigel法，參照BDBiosciences）
• 增殖指數(shù)：Ki67陽性率%（免疫組化法）

檢測范圍

1.化學(xué)藥物：涵蓋小分子化學(xué)合成藥（如抗生素、解熱鎮(zhèn)痛藥、抗癲癇藥），重點(diǎn)檢測藥物代謝產(chǎn)物（如青霉素降解物）對血管通透性的濃度依賴性影響

2.生物制品：包括重組蛋白藥物（如胰島素、生長激素）、單克隆抗體（如TNF-α抑制劑、HER2單抗），側(cè)重糖基化修飾（如N-糖鏈）對內(nèi)皮細(xì)胞完整性的長期作用

3.中藥提取物：涉及植物藥有效成分（如生物堿、黃酮類、皂苷類）及復(fù)方制劑（如感冒清熱顆粒、逍遙丸），重點(diǎn)評估多成分協(xié)同作用對皮膚/黏膜血管的影響

4.疫苗制品：包括滅活疫苗（如新冠滅活疫苗）、減毒活疫苗（如麻疹疫苗）、subunit疫苗（如HPV疫苗），側(cè)重佐劑（如鋁hydroxide）誘導(dǎo)的急性血管通透性改變

5.局部用藥物：如外用軟膏（如糖皮質(zhì)激素軟膏、抗生素軟膏）、滴眼劑（如左氧氟沙星滴眼液）、滴鼻劑（如麻黃堿滴鼻液），重點(diǎn)檢測黏膜吸收后對眼周/鼻黏膜血管的短期刺激

6.細(xì)胞治療產(chǎn)品：包括CAR-T細(xì)胞、干細(xì)胞制劑（如間充質(zhì)干細(xì)胞）、樹突狀細(xì)胞疫苗，側(cè)重細(xì)胞分泌因子（如IL-6、TNF-α）對宿主血管內(nèi)皮的長期損傷

7.基因治療藥物：如腺病毒載體（Ad5）、腺相關(guān)病毒（AAV）、siRNA藥物，重點(diǎn)評估載體材料（如脂質(zhì)體）對血管屏障的急性破壞（如靜脈注射后1h內(nèi)通透性變化）

8.輔料及添加劑：如防腐劑（如山梨酸鉀、苯扎溴銨）、增溶劑（如聚山梨酯80、吐溫20）、矯味劑（如阿斯巴甜），重點(diǎn)檢測輔料濃度（如0.1%-1%）依賴性血管通透性改變

9.化妝品原料：如美白成分（如氫醌、維生素C衍生物）、防曬劑（如二氧化鈦、氧化鋅）、染發(fā)劑（如對苯二胺），側(cè)重經(jīng)皮吸收后對真皮毛細(xì)血管的慢性損傷（如長期使用后血管擴(kuò)張）

10.農(nóng)藥及獸藥：如殺蟲劑（如擬除蟲菊酯、有機(jī)磷農(nóng)藥）、獸用抗生素（如青霉素類、頭孢菌素類），重點(diǎn)檢測動物體內(nèi)藥物殘留（如牛奶、肉類中青霉素殘留）對血管的慢性毒性

檢測方法

國際標(biāo)準(zhǔn)：

• OECD406:2011皮膚致敏性試驗(yàn)（被動皮膚過敏反應(yīng)法）：規(guī)定了體內(nèi)PCA試驗(yàn)的動物選擇（guineapig）、抗原劑量（0.1-1mg/只）、藍(lán)斑測量方法（直徑mm，精度±0.1mm）
• ISO10993-10:2010醫(yī)療器械生物學(xué)評價第10部分：刺激與致敏試驗(yàn)：涵蓋伊文思藍(lán)滲出法的組織處理（液氮研磨1min）、熒光分光光度計(jì)測定（激發(fā)波長620nm，發(fā)射波長680nm，狹縫寬度5nm）
• ASTME1986:2021體外內(nèi)皮細(xì)胞通透性測定標(biāo)準(zhǔn)方法：規(guī)定了Transwell模型的細(xì)胞接種密度（1×10^5cells/well，孔徑0.4μm）、熒光素鈉濃度（100μg/mL）、孵育時間（2h，37℃，5%CO2）
• ASTME1958:2017組胺測定標(biāo)準(zhǔn)方法（高效液相色譜法）：規(guī)定了血漿樣品前處理（固相萃取法）、色譜柱（C18，5μm，250×4.6mm）、流動相（甲醇-0.05mol/L磷酸二氫鉀=30:70，pH3.0）

• GB/T16886.10-2017醫(yī)療器械生物學(xué)評價第10部分：刺激與致敏試驗(yàn)：等效采用ISO10993-10:2010，但增加了對國產(chǎn)實(shí)驗(yàn)動物（如SPF級昆明小鼠）的微生物學(xué)指標(biāo)要求（如沙門氏菌陰性）
• GB/T34796-2017動物源性食品中組胺的測定高效液相色譜法：適用于體內(nèi)試驗(yàn)中血漿/組織組胺的測定，與ASTME1958相比，流動相調(diào)整為乙腈-0.1%磷酸（40:60），檢測波長254nm（提高對組胺的響應(yīng)值）
• YY/T1581-2018藥物過敏反應(yīng)體外試驗(yàn)內(nèi)皮細(xì)胞通透性測定：規(guī)定了體外模型的內(nèi)皮細(xì)胞株（如人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC）、培養(yǎng)條件（37℃，5%CO2，10%FBS）、TER測定儀（如EVOM2，電極間距1mm）的使用方法（每日測定1次，連續(xù)7天）
• GB/T14926.61-2001實(shí)驗(yàn)動物細(xì)胞凋亡檢測方法：規(guī)定了AnnexinV/PI雙染法的試劑濃度（AnnexinV-FITC1μg/mL，PI5μg/mL）、孵育時間（15min，避光）、流式細(xì)胞儀參數(shù)（激發(fā)波長488nm，發(fā)射波長530nm（FITC）、610nm（PI））

檢測設(shè)備

1.熒光分光光度計(jì)：HitachiF-7000（激發(fā)波長范圍200-700nm，發(fā)射波長范圍250-800nm，檢測限0.1μg/mL，straylight<0.001%）

2.酶標(biāo)儀：Bio-RadModel680（波長范圍400-750nm，吸光度范圍0-4.0A，精度±1%，重復(fù)性±0.5%）

3.原子力顯微鏡：BrukerDimensionIcon（掃描范圍150μm×150μm，分辨率0.1nm（垂直）/0.2nm（水平），最大掃描速度10Hz）

4.流式細(xì)胞儀：BDFACSCantoII（檢測通道6色，分選速度10000cells/s，靈敏度<100MESF（FITC），數(shù)據(jù)存儲格式FCS3.0）

5.實(shí)時定量PCR儀：AppliedBiosystemsStepOnePlus（反應(yīng)體積10-100μL，檢測波長523nm（FAM）、553nm（VIC）、580nm（NED），擴(kuò)增效率90%-110%，重復(fù)性±0.5Ct）

6.跨內(nèi)皮電阻儀：WorldPrecisionInstrumentsEVOM2（電阻范圍0-2000Ω·cm2，精度±5%，電極類型STX2（適合Transwell小室），溫度補(bǔ)償0-40℃）

7.冷凍切片機(jī)：LeicaCM1950（切片厚度1-100μm，溫度范圍-50℃至+20℃，振動頻率50-100Hz，刀片類型一次性鋼刀（厚度0.2mm））

8.熒光顯微鏡：OlympusIX73（物鏡倍數(shù)4×-100×（油鏡），熒光濾光片組（FITC：激發(fā)460-490nm，發(fā)射510-550nm；TRITC：激發(fā)530-560nm，發(fā)射590-650nm；DAPI：激發(fā)350-380nm，發(fā)射430-470nm），分辨率0.2μm（100×油鏡））

9.高效液相色譜儀：Agilent1260InfinityII（泵類型二元高壓梯度（最大壓力1200bar），檢測器DAD（波長范圍190-900nm，分辨率1nm），柱溫箱范圍10-80℃（精度±0.1℃），自動進(jìn)樣器進(jìn)樣體積0.1-100μL（精度±0.5%））

10.動物活體成像系統(tǒng)：PerkinElmerIVISSpectrum（激發(fā)波長范圍400-850nm（10nm步長），發(fā)射波長范圍420-870nm（10nm步長），靈敏度<1pg熒光素酶（小鼠體內(nèi)），視野范圍5-25cm）

11.細(xì)胞培養(yǎng)箱：ThermoScientificForma3111（CO2濃度范圍0-20%（精度±0.1%），溫度范圍25-45℃（精度±0.1℃），濕度>95%（通過蒸汽發(fā)生器維持），內(nèi)膽材質(zhì)316L不銹鋼（耐腐蝕））

12.電子天平：MettlerToledoXS205（最大稱量220g，可讀性0.01mg，重復(fù)性±0.02mg，線性誤差±0.03mg）

13.高速離心機(jī)：Eppendorf5810R（最大轉(zhuǎn)速15000rpm（離心力25000×g），溫度范圍-10℃至+40℃（精度±1℃），轉(zhuǎn)子類型（角轉(zhuǎn)子：F-34-6-38，容量6×38mL；水平轉(zhuǎn)子：A-4-81，容量8×100mL））

14.凝膠成像系統(tǒng)：SyngeneG:BoxF3（相機(jī)類型5MPCMOS（分辨率2592×1944），光源類型（UV：302nm，功率8W；可見光：藍(lán)473nm、綠532nm、紅635nm，功率各5W），動態(tài)范圍16-bit（65536級灰度））

15.超聲波細(xì)胞破碎儀：SonicsVCX130（功率范圍10-130W（連續(xù)可調(diào)），頻率20kHz（±100Hz），脈沖模式（0.1-9.9son/off），探頭類型（1/8英寸：適合1-5mL；1/4英寸：適合5-50mL；1/2英寸：適合50-500mL））

北京中科光析科學(xué)技術(shù)研究所【簡稱：中析研究所】

報告：可出具第三方檢測報告(電子版/紙質(zhì)版)。

檢測周期：7~15工作日，可加急。

資質(zhì)：旗下實(shí)驗(yàn)室可出具CMA/CNAS資質(zhì)報告。

標(biāo)準(zhǔn)測試：嚴(yán)格按國標(biāo)/行標(biāo)/企標(biāo)/國際標(biāo)準(zhǔn)檢測。

非標(biāo)測試：支持定制化試驗(yàn)方案。

售后：報告終身可查，工程師1v1服務(wù)。

中析儀器 資質(zhì)