參考周期：常規(guī)試驗(yàn)7-15工作日，加急試驗(yàn)5個(gè)工作日。

注意：因業(yè)務(wù)調(diào)整,暫不接受個(gè)人委托測(cè)試,望諒解(高校、研究所等性質(zhì)的個(gè)人除外)。

檢測(cè)項(xiàng)目

基因靶點(diǎn)定位檢測(cè)：

• 熒光原位雜交（FISH）：靶點(diǎn)基因拷貝數(shù)（信號(hào)數(shù)/細(xì)胞，參照ASTME2363-19）、融合基因斷裂位點(diǎn)定位（雙色探針重疊率≥80%）
• 原位聚合酶鏈反應(yīng)（insituPCR）：目標(biāo)基因片段擴(kuò)增產(chǎn)物定位（細(xì)胞內(nèi)信號(hào)分布）、突變位點(diǎn)空間定位（突變型探針雜交信號(hào)強(qiáng)度）

• 免疫組織化學(xué)（IHC）：目標(biāo)蛋白表達(dá)定位（細(xì)胞定位：胞核/胞質(zhì)/胞膜）、表達(dá)強(qiáng)度評(píng)分（H-score：0-300，參照ASCO/CAP指南）
• 免疫熒光（IF）：蛋白共定位分析（兩種靶點(diǎn)熒光信號(hào)重疊系數(shù)≥0.7）、磷酸化蛋白激活狀態(tài)定位（磷酸化位點(diǎn)特異性抗體染色）

• 實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）：靶基因mRNA表達(dá)量（Ct值≤35，相對(duì)定量：2^-ΔΔCt）、microRNA表達(dá)水平（ΔCt值差異≥2倍）
• 數(shù)字PCR（dPCR）：突變等位基因頻率（MAF，≥0.1%）、循環(huán)游離DNA（cfDNA）靶點(diǎn)濃度（copies/μL）

• Sanger測(cè)序：?jiǎn)魏塑账嶙儺悾⊿NV）位點(diǎn)（如EGFRexon19缺失、ALKL1196M）、插入/缺失突變（indel）長(zhǎng)度（±1bp）
• 下一代測(cè)序（NGS）：高頻突變位點(diǎn)覆蓋度（≥1000×）、突變豐度（≥1%）

• RNA-seq：融合基因轉(zhuǎn)錄本序列（覆蓋融合斷點(diǎn)≥50bp）、融合基因表達(dá)量（TPM≥1）
• 反轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）：融合基因產(chǎn)物長(zhǎng)度（±2bp）、融合類(lèi)型（順式/反式融合）

• 陣列比較基因組雜交（array-CGH）：基因拷貝數(shù)變異（CNV）片段大?。ā?0kb）、拷貝數(shù)變化倍數(shù)（≥2倍或≤0.5倍）
• 多重連接依賴(lài)探針擴(kuò)增（MLPA）：靶基因拷貝數(shù)（±1copy）、拷貝數(shù)變異區(qū)域定位（染色體臂水平）

• 亞硫酸氫鹽測(cè)序：CpG島甲基化率（≥5%）、甲基化位點(diǎn)分布（啟動(dòng)子區(qū)域）
• 甲基化特異性PCR（MSP）：甲基化等位基因比例（≥10%）

• 雙熒光素酶報(bào)告基因assay：靶基因3'UTR結(jié)合位點(diǎn)驗(yàn)證（熒光活性降低≥50%）、microRNA-mRNA相互作用強(qiáng)度（相對(duì)熒光值比值）
• RNA免疫沉淀（RIP）：結(jié)合靶mRNA的microRNA富集倍數(shù)（≥2倍）

• CTC表面標(biāo)志物定位：EpCAM（細(xì)胞膜定位）、CK19（胞質(zhì)定位）
• CTC內(nèi)靶點(diǎn)基因檢測(cè)：EGFR突變（exon19缺失）、HER2擴(kuò)增（拷貝數(shù)≥6）
• CTC計(jì)數(shù)與靶點(diǎn)共定位：CTC數(shù)量（≥1個(gè)/7.5mL血液）、靶點(diǎn)表達(dá)陽(yáng)性率（≥20%）

• 外泌體表面蛋白靶點(diǎn)：PD-L1（表達(dá)量，流式細(xì)胞術(shù)MFI值）、CD63（陽(yáng)性率≥80%）
• 外泌體內(nèi)核酸靶點(diǎn)：circRNA表達(dá)量（qPCRCt值≤38）、突變型DNA片段（數(shù)字PCRMAF≥0.01%）

• RNA原位雜交（RNA-ISH）：融合基因轉(zhuǎn)錄本空間定位（細(xì)胞內(nèi)顆粒狀信號(hào)）、表達(dá)水平評(píng)分（信號(hào)密度：1-4級(jí)）
• 單細(xì)胞RNA-seq：?jiǎn)蝹€(gè)細(xì)胞內(nèi)融合基因轉(zhuǎn)錄本（UMI計(jì)數(shù)≥5）、融合斷點(diǎn)序列（覆蓋≥10個(gè)reads）

檢測(cè)范圍

1.腫瘤組織標(biāo)本：涵蓋肺癌、乳腺癌、結(jié)腸癌等常見(jiàn)惡性腫瘤手術(shù)/活檢組織，重點(diǎn)檢測(cè)驅(qū)動(dòng)基因突變（如EGFR、ALK）及蛋白靶點(diǎn)（如PD-L1）的空間定位與表達(dá)水平

2.細(xì)胞系標(biāo)本：腫瘤細(xì)胞系（如A549、MCF-7）及正常對(duì)照細(xì)胞系，側(cè)重靶點(diǎn)基因拷貝數(shù)變異（CNV）及融合基因（如EML4-ALK）的鑒定

3.血液標(biāo)本：外周血、骨髓血等，重點(diǎn)檢測(cè)循環(huán)游離DNA（cfDNA）中的突變位點(diǎn)（如KRASG12C）及循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC）表面標(biāo)志物（如EpCAM）

4.體液標(biāo)本：胸腔積液、腹水、腦脊液等，側(cè)重外泌體靶點(diǎn)（如miR-21）及脫落細(xì)胞內(nèi)蛋白靶點(diǎn)（如CA125）的定位與定量

5.穿刺標(biāo)本：肝穿刺、腎穿刺等小組織標(biāo)本，重點(diǎn)檢測(cè)癌基因（如MYC）擴(kuò)增及抑癌基因（如p53）突變的空間分布

6.石蠟包埋標(biāo)本（FFPE）：archival組織標(biāo)本，側(cè)重靶點(diǎn)基因甲基化狀態(tài)（如MGMT啟動(dòng)子甲基化）及蛋白表達(dá)（如HER2）的回顧性分析

7.新鮮冰凍標(biāo)本：手術(shù)新鮮組織冰凍切片，重點(diǎn)檢測(cè)融合基因（如ROS1）的原位雜交信號(hào)及蛋白靶點(diǎn)（如VEGF）的免疫熒光定位

8.尿液標(biāo)本：尿液沉渣及尿液外泌體，側(cè)重膀胱癌相關(guān)靶點(diǎn)（如FGFR3突變）及microRNA（如miR-155）的檢測(cè)

9.唾液標(biāo)本：唾液外泌體及脫落細(xì)胞，重點(diǎn)檢測(cè)口腔癌相關(guān)靶點(diǎn)（如HPVE6/E7mRNA）及基因拷貝數(shù)變異（如CCND1擴(kuò)增）

10.腦脊液標(biāo)本：神經(jīng)腫瘤患者腦脊液，側(cè)重循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC）靶點(diǎn)（如GFAP）及融合基因（如NTRK1）的檢測(cè)

檢測(cè)方法

國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)：

• ISO15189:2022醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力要求（涵蓋分子病理學(xué)檢測(cè)的質(zhì)量管理，包括方法驗(yàn)證、結(jié)果報(bào)告等環(huán)節(jié)）
• ASTME2363-19熒光原位雜交（FISH）檢測(cè)基因拷貝數(shù)變異的標(biāo)準(zhǔn)指南（規(guī)定了FISH檢測(cè)的樣本處理、探針設(shè)計(jì)及信號(hào)判讀標(biāo)準(zhǔn)）
• CLSIC24-A4臨床分子生物學(xué)檢測(cè)的質(zhì)量保證（提供了PCR、測(cè)序等分子檢測(cè)方法的驗(yàn)證流程及室內(nèi)質(zhì)控要求）

• GB/T35029-2018分子病理診斷技術(shù)規(guī)范（明確了基因檢測(cè)、免疫組化等方法的操作步驟及結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)）
• GB/T21767-2008臨床實(shí)驗(yàn)室定量測(cè)定室內(nèi)質(zhì)量控制指南（適用于核酸定量檢測(cè)的室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則，如1-3s規(guī)則）
• WS/T766-2020新型冠狀病毒肺炎實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)指南（參考了分子檢測(cè)的樣本處理、核酸提取及PCR擴(kuò)增流程）

檢測(cè)設(shè)備

1.熒光原位雜交儀：雅培VysisPathVysion（檢測(cè)通道：4色熒光，分辨率：≤100kb）

2.免疫組化染色儀：羅氏BenchMarkJianCeTRA（染色速度：60分鐘/批，抗體加載精度：±1μL）

3.實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀：AppliedBiosystemsQuantStudio7Flex（檢測(cè)通道：6色，靈敏度：1copy/μL）

4.下一代測(cè)序儀：IlluminaNovaSeq6000（讀長(zhǎng)：150bppaired-end，通量：1.2Tb/run）

5.數(shù)字PCR儀：Bio-RadQX200（檢測(cè)通道：2色，分辨率：0.01%突變豐度）

6.激光掃描共聚焦顯微鏡：蔡司LSM900（物鏡：63×油鏡，分辨率：≤200nm）

7.流式細(xì)胞儀：BDFACSAriaIII（檢測(cè)參數(shù)：18色熒光，分選純度：≥98%）

8.亞硫酸氫鹽測(cè)序儀：ThermoFisherIonS5XL（讀長(zhǎng)：400bp，覆蓋度：≥100×）

9.多重連接依賴(lài)探針擴(kuò)增儀：MRC-HollandSALSAMLPA（檢測(cè)位點(diǎn)：≤45個(gè)/反應(yīng)，靈敏度：±1copy）

10.外泌體分離系統(tǒng)：ThermoFisherTotalExosomeIsolation（回收率：≥80%，純度：CD63陽(yáng)性率≥90%）

11.循環(huán)腫瘤細(xì)胞捕獲儀：CellSearchSystem（捕獲效率：≥80%，檢測(cè)限：1個(gè)CTC/7.5mL血液）

12.甲基化特異性PCR儀：Bio-RadCFX96（檢測(cè)通道：4色，重復(fù)性：CV≤5%）

13.RNA-seq文庫(kù)制備系統(tǒng)：IlluminaNexteraXT（文庫(kù)片段大?。?00-500bp，產(chǎn)量：≥10ng/μL）

14.免疫熒光染色儀：LeicaBondMax（染色周期：30-90分鐘，抗體交叉污染率：≤0.1%）

15.微陣列芯片掃描儀：AgilentSureScan（分辨率：2μm，動(dòng)態(tài)范圍：0-65535）

北京中科光析科學(xué)技術(shù)研究所【簡(jiǎn)稱(chēng)：中析研究所】

報(bào)告：可出具第三方檢測(cè)報(bào)告(電子版/紙質(zhì)版)。

檢測(cè)周期：7~15工作日，可加急。

資質(zhì)：旗下實(shí)驗(yàn)室可出具CMA/CNAS資質(zhì)報(bào)告。

標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試：嚴(yán)格按國(guó)標(biāo)/行標(biāo)/企標(biāo)/國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)。

非標(biāo)測(cè)試：支持定制化試驗(yàn)方案。

售后：報(bào)告終身可查，工程師1v1服務(wù)。

中析儀器 資質(zhì)