參考周期：常規(guī)試驗7-15工作日，加急試驗5個工作日。

注意：因業(yè)務(wù)調(diào)整,暫不接受個人委托測試,望諒解(高校、研究所等性質(zhì)的個人除外)。

檢測項目

miRNA表達(dá)分析：

• 高通量測序：序列覆蓋度≥99%、讀取深度≥30X（參照Illumina標(biāo)準(zhǔn)）
• qPCR驗證：Ct值≤35、擴(kuò)增效率90%-110%（參照MIQE指南）
• 表達(dá)譜差異：foldchange≥2、p值<0.05

• 生物信息學(xué)分析：保守性得分≥0.8、結(jié)合位點(diǎn)預(yù)測（算法：TargetScan）
• 序列比對：同源性≥80%、自由能≤-10kcal/mol
• 功能富集：GO術(shù)語富集p<0.01、KEGG通路分析

• RT-qPCR檢測：基因表達(dá)量foldchange≥2、內(nèi)參基因穩(wěn)定性（CV≤0.2）
• Westernblot：蛋白表達(dá)灰度值差異≥20%、β-actin歸一化
• 熒光原位雜交：信號強(qiáng)度≥背景3倍、定位準(zhǔn)確性

• CCK-8assay：OD450值變化率、細(xì)胞存活率≥80%（參照ISO10993-5）
• LDH釋放：釋放率≤10%、線性范圍0-100%
• 臺盼藍(lán)染色：死細(xì)胞比例≤5%、計數(shù)精度±2%

• AnnexinV/PI染色：凋亡細(xì)胞比例、早期/晚期區(qū)分
• Caspase-3活性：活性單位≥基線1.5倍、熒光強(qiáng)度
• TUNEL檢測：陽性細(xì)胞數(shù)≥對照組2倍、核定位

• ROS水平：DCF熒光強(qiáng)度、相對變化率
• SOD活性：U/mg蛋白≥30、檢測限0.1U
• GSH含量：nmol/mg蛋白、標(biāo)準(zhǔn)曲線R2≥0.99

• ELISA檢測：TNF-α濃度pg/mL、IL-6標(biāo)準(zhǔn)曲線
• 細(xì)胞因子陣列：信號強(qiáng)度比、多因子同步分析
• qPCR驗證：炎癥基因表達(dá)foldchange

• 膜片鉗記錄：動作電位持續(xù)時間ms、復(fù)極90%時間
• 鈣瞬變檢測：熒光比率F340/F380、峰值幅度
• 收縮力測量：縮短分?jǐn)?shù)≥5%、力-頻率關(guān)系

• 免疫組化：陽性細(xì)胞計數(shù)、染色強(qiáng)度分級
• HE染色：組織結(jié)構(gòu)完整性、壞死區(qū)域占比
• 透射電鏡：線粒體結(jié)構(gòu)、嵴完整性

• 灌流參數(shù)：冠脈流量mL/min、左室發(fā)展壓力mmHg
• 基因敲除驗證：敲除效率≥70%、表型一致性
• 藥效評估：EC50值、劑量響應(yīng)曲線

檢測范圍

1.人類原代心肌細(xì)胞：來源于心外科手術(shù)樣本，重點(diǎn)檢測miRNA表達(dá)譜變異和缺血損傷響應(yīng)。

2.大鼠心肌細(xì)胞系（H9c2）：用于高通量篩選，側(cè)重靶基因預(yù)測驗證和藥物毒性評估。

3.小鼠心肌細(xì)胞：涵蓋轉(zhuǎn)基因模型，檢測基因編輯后miRNA-靶基因互作和功能恢復(fù)。

4.灌流心臟模型（Langendorff系統(tǒng)）：模擬生理灌流，核心檢測電生理參數(shù)和氧化應(yīng)激指標(biāo)。

5.缺血再灌流損傷模型：誘導(dǎo)時間30min缺血/60min再灌，重點(diǎn)評估凋亡率和炎癥因子釋放。

6.缺氧復(fù)氧模型：缺氧24h/復(fù)氧4h，檢測細(xì)胞活力恢復(fù)和ROS水平變化。

7.藥物處理心肌細(xì)胞：暴露于心血管藥物，側(cè)重miRNA調(diào)控機(jī)制和EC50值測定。

8.CRISPR-Cas9編輯細(xì)胞：靶基因敲除或過表達(dá)，驗證miRNA結(jié)合位點(diǎn)和表型一致性。

9.干細(xì)胞分化心肌細(xì)胞：iPS來源，檢測分化效率≥90%和功能成熟度參數(shù)。

10.心肌梗死病理模型：結(jié)扎誘導(dǎo)，重點(diǎn)分析組織學(xué)損傷和基因表達(dá)修復(fù)。

檢測方法

國際標(biāo)準(zhǔn)：

• ISO20391-1:2018細(xì)胞計數(shù)和活力分析方法
• MIQE指南qPCR實(shí)驗最低信息標(biāo)準(zhǔn)
• ENISO10993-5醫(yī)療器械細(xì)胞毒性測試
• ISO17025檢測實(shí)驗室通用要求

• GB/T16886.5-2017醫(yī)療器械生物學(xué)評價細(xì)胞毒性試驗
• YY/T0606.25-2014分子生物學(xué)檢測用試劑標(biāo)準(zhǔn)
• GB/T37877-2019核酸提取純化方法
• GB/T34797-2017細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)規(guī)范

檢測設(shè)備

1.實(shí)時熒光定量PCR儀：Bio-RadCFX96型（檢測通道：6通道，溫度精度±0.1°C）

2.高通量測序儀：IlluminaNovaSeq6000型（通量：20Breads/run，讀長2x150bp）

3.流式細(xì)胞儀：BDFACSCelesta型（激光波長：488nm/640nm，檢測限：100事件/秒）

4.倒置熒光顯微鏡：OlympusIX83型（分辨率：0.2μm，物鏡倍數(shù)：40x）

5.膜片鉗系統(tǒng)：AxonMultiClamp700B型（采樣率：50kHz，阻抗范圍：1MΩ-100MΩ）

6.酶標(biāo)儀：TecanInfiniteM200型（波長范圍：200-1000nm，精度：±1%）

7.高速離心機(jī)：Eppendorf5430R型（最大轉(zhuǎn)速：15,000rpm，容量：24x1.5mL）

8.CO2培養(yǎng)箱：ThermoScientificHeracell150i型（CO2控制：±0.1%，溫度范圍：4-50°C）

9.Westernblot系統(tǒng)：Bio-RadTrans-BlotTurbo型（轉(zhuǎn)移時間：7min，電壓范圍：25-100V）

10.微量分光光度計：NanoDropOne型（樣品體積：1μL，檢測限：2ng/μL）

11.冰凍切片機(jī)：LeicaCM1950型（切片厚度：5-50μm，溫度：-20°C）

12.凝膠成像系統(tǒng)：SyngeneG:BOX型（分辨率：6.5MP，動態(tài)范圍：16-bit）

13.心臟灌流裝置：HugoSachsElektronik型（壓力范圍：40-120mmHg，流量精度：±5%）

14.自動細(xì)胞計數(shù)器：CountessIIFL型（計數(shù)精度：±5%，熒光檢測通道）

15.超低溫冰箱：HaierDW-86L388型（溫度：-86°C，容積：388L）

北京中科光析科學(xué)技術(shù)研究所【簡稱：中析研究所】

報告：可出具第三方檢測報告(電子版/紙質(zhì)版)。

檢測周期：7~15工作日，可加急。

資質(zhì)：旗下實(shí)驗室可出具CMA/CNAS資質(zhì)報告。

標(biāo)準(zhǔn)測試：嚴(yán)格按國標(biāo)/行標(biāo)/企標(biāo)/國際標(biāo)準(zhǔn)檢測。

非標(biāo)測試：支持定制化試驗方案。

售后：報告終身可查，工程師1v1服務(wù)。

中析儀器 資質(zhì)