參考周期：常規(guī)試驗(yàn)7-15工作日，加急試驗(yàn)5個(gè)工作日。

注意：因業(yè)務(wù)調(diào)整,暫不接受個(gè)人委托測試,望諒解(高校、研究所等性質(zhì)的個(gè)人除外)。

檢測項(xiàng)目

樣本預(yù)處理：

• 細(xì)胞離心分離：轉(zhuǎn)速≥3000rpm（參照ISO17025），離心時(shí)間5-10min
• 樣本沉淀處理：沉淀量≥50μL，雜質(zhì)去除率≥95%
• 緩沖液優(yōu)化：pH值7.0-7.5，離子強(qiáng)度≤0.1M

• 總RNA濃度：≥10ng/μL（參照GB/T37871），OD260/280≥1.8
• miRNA富集效率：回收率≥90%，片段大小18-25nt
• 抑制劑移除：殘留蛋白≤0.01μg/μL，抑制劑清除率≥99%

• 接頭連接效率：連接成功率≥98%，適配子濃度≥10nM
• PCR擴(kuò)增：循環(huán)數(shù)≤15，擴(kuò)增偏差±5%
• 片段篩選：大小范圍150-300bp，篩選精度≥99.5%

• 測序深度：≥20Mreadspersample（參照ISO20395），覆蓋度≥90%
• 讀長設(shè)置：單端讀長≥50bp，雙端讀長≥150bp
• 錯(cuò)誤率控制：堿基錯(cuò)誤率≤0.1%，Q30分?jǐn)?shù)≥80%

• 原始數(shù)據(jù)過濾：低質(zhì)量read去除率≥95%，接頭污染≤0.5%
• 序列比對率：參考基因組比對率≥85%，唯一映射率≥70%
• GC含量偏差：GC%范圍40-60%，偏差±2%

• miRNA定量：表達(dá)量TPM值范圍10-10000，檢測靈敏度≤1CPM
• 差異表達(dá)分析：log2FC≥1或≤-1，p值≤0.05
• 變異系數(shù)評估：CV≤15%，重復(fù)性驗(yàn)證≥98%

• qPCR交叉驗(yàn)證：Ct值≤35，擴(kuò)增效率90-110%
• 靶基因預(yù)測：預(yù)測準(zhǔn)確率≥85%，結(jié)合位點(diǎn)≥1
• 通路富集分析：p值≤0.01，F(xiàn)DR≤0.05

• 聚類分析：樣本聚類距離≤0.1，相似度≥90%
• 網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建：節(jié)點(diǎn)連接度≥5，邊權(quán)重≥0.7
• 預(yù)后相關(guān)性：HR值≥1.5，置信區(qū)間95%

• 凍融循環(huán)耐受：循環(huán)次數(shù)≥3，表達(dá)變化≤10%
• 長期儲(chǔ)存評估：-80°C儲(chǔ)存≥6月，降解率≤5%
• 批次間差異：RSD≤8%，偏移校正因子±5%

• 特異性檢測：非目標(biāo)miRNA交叉反應(yīng)率≤0.1%
• 靈敏度閾值：最低檢測限≤0.1fmol，動(dòng)態(tài)范圍10^6
• 干擾因素測試：抑制劑影響≤5%，基質(zhì)效應(yīng)CV≤10%

檢測范圍

1.腦脊液樣本：涵蓋神經(jīng)疾病患者及健康對照組，重點(diǎn)檢測miRNA表達(dá)穩(wěn)定性和疾病相關(guān)差異表達(dá)譜

2.血清樣本：用于比較分析，側(cè)重miRNA濃度變化及血液-腦脊液屏障穿透效應(yīng)驗(yàn)證

3.血漿樣本：檢測循環(huán)miRNA特征，關(guān)注抗凝劑干擾及表達(dá)一致性評估

4.尿液樣本：分析非侵入性來源，重點(diǎn)檢測降解產(chǎn)物影響及低豐度miRNA捕獲效率

5.細(xì)胞培養(yǎng)上清液：源自神經(jīng)細(xì)胞模型，側(cè)重體外條件下miRNA分泌動(dòng)態(tài)及刺激響應(yīng)驗(yàn)證

6.組織裂解液：如腦組織提取物，檢測復(fù)雜基質(zhì)背景下miRNA分離純化及背景噪聲控制

7.外泌體富集樣本：分離囊泡相關(guān)miRNA，重點(diǎn)檢測粒徑分布≥50nm及標(biāo)志蛋白陽性率≥95%

8.凍存生物庫樣本：長期保存標(biāo)本，評估凍融循環(huán)耐受性及RNA完整性指數(shù)RIN≥7.0

9.疾病特異樣本：如阿爾茨海默癥患者標(biāo)本，側(cè)重病理階段相關(guān)miRNA圖譜及診斷閾值確立

10.合成miRNA對照：人工合成序列，用于方法靈敏度和特異性校準(zhǔn)及陽性對照驗(yàn)證

檢測方法

國際標(biāo)準(zhǔn)：

• ISO20395:2019Biotechnology-Requirementsforevaluatingtheperformanceofquantificationmethodsfornucleicacidtargetsequences
• ISO17025:2017Generalrequirementsforthecompetenceoftestingandcalibrationlaboratories
• EN15604:2018Molecularinvitrodiagnosticexaminations-Specificationsforpre-examinationprocessesforfrozentissue

• GB/T37871-2019高通量基因測序樣本預(yù)處理規(guī)范
• GB/T30987-2014生物樣本中核酸提取與純化方法
• GB/T35538-2017微小RNA測序數(shù)據(jù)分析通用要求

檢測設(shè)備

1.臺(tái)式高速離心機(jī)：Eppendorf5427R型（最高轉(zhuǎn)速25000rpm，溫度控制范圍-20°C至40°C）

2.分光光度計(jì)：ThermoNanoDropOne型（波長范圍200-850nm，靈敏度0.1ng/μL）

3.自動(dòng)化核酸提取儀：QiagenQiacube型（通量1-12樣本/批次，提取效率≥95%）

4.高通量測序儀：IlluminaNovaSeq6000型（通量20Breads/run，讀長2x150bp）

5.PCR擴(kuò)增系統(tǒng)：Bio-RadCFX96型（溫度精度±0.1°C，多通道檢測≥96孔）

6.實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀：RocheLightCycler480型（動(dòng)態(tài)范圍10^7，檢測限≤0.1copies）

7.生物分析儀：Agilent2100型（片段分析精度±1bp，芯片通量12樣本/次）

8.超低溫冰箱：HaierDW-86L628型（溫度范圍-86°C，溫度波動(dòng)±1°C）

9.凝膠電泳系統(tǒng)：Bio-RadPowerPac型（電壓范圍10-300V，電流精度±0.1A）

10.微量振蕩器：IKAMS3型（轉(zhuǎn)速50-3000rpm，計(jì)時(shí)精度±1s）

11.真空濃縮儀：EppendorfConcentratorPlus型（蒸發(fā)效率≥50μL/min，溫度控制30-80°C）

12.恒溫混勻儀：BenchmarkScientificMultiTherm型（溫度范圍4-100°C，振蕩頻率0-1500rpm）

13.生物安全柜：EscoAC2-4S1型（潔凈度Class100，風(fēng)速0.3-0.5m/s）

14.數(shù)據(jù)服務(wù)器：DellPowerEdgeR750型（存儲(chǔ)容量≥100TB，處理速度≥3GHz）

15.冷凍干燥機(jī)：LabconcoFreeZone型（真空度≤100mTorr，溫度范圍-50°C至40°C）

北京中科光析科學(xué)技術(shù)研究所【簡稱：中析研究所】

報(bào)告：可出具第三方檢測報(bào)告(電子版/紙質(zhì)版)。

檢測周期：7~15工作日，可加急。

資質(zhì)：旗下實(shí)驗(yàn)室可出具CMA/CNAS資質(zhì)報(bào)告。

標(biāo)準(zhǔn)測試：嚴(yán)格按國標(biāo)/行標(biāo)/企標(biāo)/國際標(biāo)準(zhǔn)檢測。

非標(biāo)測試：支持定制化試驗(yàn)方案。

售后：報(bào)告終身可查，工程師1v1服務(wù)。

中析儀器 資質(zhì)